0546-7760666
0546-7760666
內(nèi)標法的的一些總結(jié)
內(nèi)標法是結(jié)合了峰面積歸一法和外標法的優(yōu)點的一種方法，它在加入內(nèi)標物后，按峰面積歸一法的分析方法進行分析，這就避免了由于進樣的一致性及樣品歧視效應(yīng)導(dǎo)致的偶然誤差。因而，它的分析精密度也是比較高的，是一種比較理想的定量分析方法。它的弱點是前處理比較復(fù)雜，所花費的時間也比較長，同時必須要有合適的標樣及內(nèi)標物才能進行內(nèi)標法定量分析。
01內(nèi)標法的優(yōu)缺點
內(nèi)標法的優(yōu)點：
對進樣量不嚴格要求，測定的結(jié)果也較為準確，由于通過測量內(nèi)標物及被測組分的峰面積的相對值來進行計算的，因而在一定程度上消除了進樣量、儀器不穩(wěn)定等變化所引起的誤差，只對欲分析的組分峰做校正。
內(nèi)標法的缺點
是必須加一個組分進到樣品，易增加面積測量誤差。操作程序較為麻煩，每次分析時內(nèi)標物和試樣都要準確稱量，有時尋找合適的內(nèi)標物也有困難。
02內(nèi)標物的選擇原則
采用內(nèi)標法定量時，內(nèi)標物的選擇是一項十分重要的工作。理想地說，內(nèi)標物應(yīng)當是一個能得到純樣的已知化合物，這樣它能以準確、已知的量加到樣品中去，它應(yīng)當和被分析的樣品組分有基本相同或盡可能一致的物理化學性質(zhì)(如化學結(jié)構(gòu)、極性、揮發(fā)度及在溶劑中的溶解度等)、色譜行為和響應(yīng)特征，最好是被分析物質(zhì)的一個同系物。
當然，在色譜分析條件下，內(nèi)標物必須能與樣品中各組分充分分離。需要指出的是，在少數(shù)情況下，分析人員可能比較關(guān)心化合物在一個復(fù)雜過程中所得到的回收率，此時，他可以使用一種在這種過程中很容易被完全回收的化合物作內(nèi)標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。
對于內(nèi)標法定量分析來說，內(nèi)標物的選擇必須滿足如下的條件：
1、內(nèi)標物與被分析物質(zhì)的物理化學性質(zhì)要相似（如：沸點、極性、化學結(jié)構(gòu)等）；
2、內(nèi)標物應(yīng)是該試樣中不存在的純物質(zhì)；
3、它必須完全溶于被測樣品（或溶劑）中，且不與被測樣品起化學反應(yīng)；并與試樣中各組分的色譜峰能完全分離；
4、能加入內(nèi)標物的量應(yīng)接近于被測組分；
5、色譜峰的位置應(yīng)與被測組分的色譜峰的位置相近，或在幾個被測組分色譜峰中間。且又不共溢出，目的是為了避免儀器的不穩(wěn)定性所造成的靈敏度的差異；
6、選擇合適的內(nèi)標物加入量，使得內(nèi)標物和被分析物質(zhì)二者峰面積的匹配性大于75%，以免由于它們處在不同響應(yīng)值區(qū)域而導(dǎo)致的靈敏度偏差。
需要指出的是，在少數(shù)情況下，分析人員可能比較關(guān)心化臺物在一個復(fù)雜過程中所得到的回收率，此時，可以使用在這過程中很容易被完全回收的化臺物作內(nèi)標，來測定感興趣化合物的百分回收率，而不必遵循以上所說的選擇原則。
03內(nèi)標法操作
將已知量的內(nèi)標樣加入標準樣品，制成混合標樣，并配制一系列的已知濃度的工作標樣。混合標樣中標樣與內(nèi)標樣的摩爾比不變。
注入色譜柱，以（標樣峰面積/內(nèi)標樣峰面積）為響應(yīng)值。
根據(jù)響應(yīng)值與工作標樣濃度之間存在的線性關(guān)系，即W=f×A，制成標準曲線。
將已知量的內(nèi)標樣加入未知樣品，注入色譜柱，得到欲測組分的響應(yīng)值。
根據(jù)已知的系數(shù)f，即可求出欲測組分的濃度。
內(nèi)標法的特點：
操作過程中樣品和內(nèi)標是混合在一起注入色譜柱的，因此只要混合溶液中被測組分與內(nèi)標的量的比值恒定，上樣體積的變化不會影響影響定量結(jié)果。
內(nèi)標法抵消了上樣體積，乃至流動相、檢測器的影響，因此比外標法精確。
04制作內(nèi)標標準曲線
在用內(nèi)標法做色譜定量分析時，先配制一定重量比的被測組分和內(nèi)標樣品的混合物做色譜分析，測量峰面積，做重量比和面積比的關(guān)系曲線，此曲線即為標準曲線。
在實際樣品分析時所采用的色譜條件應(yīng)盡可能與制作標準曲線時所用的條件一致，因此，在制作標準曲線時，不僅要注明色譜條件(如固定相、柱溫、載氣流速等)，還應(yīng)注明進樣體積和內(nèi)標物濃度。
在制作內(nèi)標標準曲線時，各點并不完全落在直線上，此時應(yīng)求出面積比和重量比的比值與其平均位的標準偏差，在使用過程中應(yīng)定期進行單點校正，若所得值與平均值的偏差小于2，曲線仍可使用，若大于2，則應(yīng)重作曲線，如果曲線在鉸短時期內(nèi)即產(chǎn)生變動，則不宜使用內(nèi)標法定量。
05小結(jié)
內(nèi)標法是一種間接或相對的校準方法。在分析測定樣品中某組分含量時，加入一種內(nèi)標物質(zhì)以校準和消除出于操作條件的波動而對分析結(jié)果產(chǎn)生的影響，以提高分析結(jié)果的準確度。